De här kiten ger en bekväm och mycket känslig lösning för realtids-PCR med omvänt transkriptas (qRT-PCR) för RNA-templat med hjälp av hybridiseringsprobdetekteringskemi, t.ex. med TaqMan® 5'-hydrolys prober.

Systemet medger att cDNA-syntes och PCR-amplifiering genomförs i samma rör. Det är idealiskt för kvantifiering med hög känslighet av RNA-virus eller RNA-mål med låg abundans, samt även för genuttrycksstudier med hög genomströmning. Det har också optimerats för att ge maximal RT-PCR-effektivitet, -känslighet och -specificitet i reducerade reaktionsvolymer och vid snabba cykeltider.

One-Step Fast mix tillhandahålls som 4X koncentrerad lösning så att man kan lägga till större mängder RNA-templat och få en förbättrad detektionskänslighet med prover med låg koncentration. Den unika formeln maximerar aktiviteten hos både det reverse transkriptaset och Taq DNA-polymeraset samtidigt som potentialen för 'primer-dimer' och andra icke-specifika PCR-artefakter minimeras. Därmed möjliggörs objektiv co-amplifiering av low-copy transkript i närvaro av referensgener med högre kopiering i duplexerade qRT-PCR-tillämpningar.

Högspecifik amplifiering är avgörande för att en qRT-PCR reaktion ska lyckas eftersom icke-specifika produkter kan konkurrera om amplifieringen av målsekvensen och försämra PCR-effektiviteten. En viktig komponent i dessa kit är AccuStart™ Taq DNA-polymeraset med monoklonala antikroppar som binds till polymeraset och håller det inaktivt under reaktionssammansättningen och steget för omvänd transkription vid 50 °C. Ett kort värmeaktiveringssteg på 30 sekunder vid 95 °C denaturerar antikropparna irreversibelt och frigör fullt aktivt, omodifierat Taq DNApolymeras. Snabb återvinning av fullt aktivt, omodifierat Taq DNA-polymeras är av avgörande betydelse för effektiv extensionskinetik. Därför ger dessa kit en bättre reagensekonomi och genomströmning i laboratoriet när det gäller konventionella qPCR-system eller system med snabb rampningshastighet.