Questi kit offrono una soluzione pratica ed estremamente sensibile per RT-PCR in Real Time (qRT-PCR) di templati a RNA mediante l'uso di sonde d'ibridazione come le Taqman® a idrolisi al 5'.

Il sistema consente la sintesi di cDNA e l'amplificazione PCR eseguite nella stessa provetta. È ideale per ottenere una quantificazione estremamente sensibile di virus a RNA o RNA target a basso numero di copie e per studi di espressione genica ad alta resa. Il sistema è stato ottimizzato per offrire la massima efficienza, sensibilità e specificità della RT-PCR con volumi di reazione ridotti e tempi di ciclo rapidi.

Le miscele One-Step Fast Master sono fornite come soluzioni con concentrazione 4X per consentire l'aggiunta di quantità maggiori di RNA stampo e offrire una migliore sensibilità con campioni a bassa concentrazione. L'esclusiva formulazione massimizza le attività della trascrittasi inversa e della Taq DNA polimerasi mentre riduce al minimo la possibilità di formazioni di dimeri di prime e di altri artefatti PCR non specifici. Ciò consente la corretta coamplificazione di trascritti presenti in basso numero di copie in presenza di geni di riferimento presenti in un numero di copie più elevato in applicazioni qRT-PCR duplex.

L'amplificazione ad elevata specificità è fondamentale per il successo della qRT-PCR, in quanto prodotti non specifici possono competere con la sequenza target per l'amplificazione l'amplificazione e compromettere l'efficienza della PCR. Un componente chiave di questi kit è la Taq DNA polimerasi AccuStart™ con anticorpi monoclonali che si legano alla polimerasi e la mantengono inattiva durante la preparazione della reazione e la fase di trascrizione inversa a 50 °C. Una breve fase di attivazione termica di 30 secondi a 95 °C denatura irreversibilmente gli anticorpi, rilasciando la Taq DNA polimerasi completamente attiva e non modificata. Un rapido rilascio della Taq DNA polimerasi completamente attiva e non modificata è fondamentale per un'estensione efficace. Pertanto, questi kit consentono di risparmiare sui reagenti e ottenere un'elevata resa in laboratorio rispetto ai sistemi qPCR tradizionali o con velocità di rampa rapida.