Ces kits offrent une solution pratique et très sensible pour une transcriptase inverse PCR (qRT-PCR) en temps réel des modèles d'ARN à l'aide de compositions chimiques de détection par sone d'hybridation telles que les sondes TaqMan® 5'-hydrolysis.

Le système permet de réaliser la synthèse de l'ADN complémentaire et l'amplification PCR dans le même tube. Il est idéal pour la quantification très précise des virus de l'ARN ou des cibles d'ARN peu abondantes, ainsi que pour les études d'expression génique à haut rendement. Il est également conçu pour offrir une efficacité, une sensibilité et une spécificité de RT-PCR optimales dans les volumes de réaction réduits et les temps de cycle rapides.

Des mélanges rapides principaux en une étape sont fournis sous forme de solution 4X concentrée afin d'ajouter de plus grandes quantités de modèles d'ARN et de permettre une meilleure sensibilité de détection avec des échantillons à faible concentration. Cette formule unique optimise les activités de transcriptase inverse et d'ADN polymérase Taq tout en réduisant le risque de dimère d'amorce et autres artéfacts PCR non spécifiques. Cela permet une co-amplification non biaisée de transcripts à faible nombre de copies en présence de gènes de référence à plus grand nombre de copies dans les applications qRT-PCR en duplex.

Une amplification très spécifique est essentielle pour une qRT-PCR réussie, étant donné que les produits non spécifiques peuvent entraver l'amplification de la séquence ciblée et altérer l'efficacité de la PCR. Un des composants clés de ces kits est l'ADN polymérase AccuStart™ Taq avec des anticorps monoclonaux qui se lient à la polymérase et la gardent inactive durant l'assemblage des réactions et l'étape de transcription inverse à 50 °C. Une brève étape d'activation thermique (30 secondes) à 95 °C dénature de manière irréversible les anticorps, libérant l'ADN polymérase Taq entièrement active et non modifiée. Une récupération rapide de l'ADN polymérase Taq entièrement active et non modifiée est essentielle pour une cinétique d'extension efficace. Par conséquent, ces kits permettent une plus grande économie de réactifs et un meilleur rendement en laboratoire sur des systèmes qPCR conventionnels ou rapides.