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Cette activité de laboratoire est conçue pour démontrer les différentes classes de molécules de protéines et leur classification d'après leur solubilité. Les étudiants s'initient au fractionnement des protéines membranaires solubles et insolubles, et des protéines du cytosquelette provenant d'un échantillon de tissu. La fraction de protéine insoluble est davantage fractionnée en protéines membranaires hydrophiles et hydrophobes. La structure des membranes cellulaires et le rôle des protéines membranaires hydrophobes sont pris en compte. Cette activité de laboratoire offre également la possibilité de comprendre les caractéristiques de différentes classes de détergents et le rôle de ces dernières dans la solubilisation des protéines membranaires hydrophobes.

Supplier: G-Biosciences

Le kit des propriétés physiques des protéines est une activité de laboratoire qui permet aux étudiants de se pencher sur les propriétés physiques de différentes protéines. Les étudiants se familiarisent avec la solubilité des protéines et apprennent comment elle est affectée par des paramètres variés, tels que la température, le pH, le sel et la constante diélectrique. Ils assimilent la précipitation des protéines due au pH, à une grande concentration de sel et en présence de solvants organiques, et la dénaturation des protéines résultant d'une température élevée. De plus, le kit démontre dans quelle mesure les non-protéines, comme les détergents, modifient considérablement les propriétés physiques des molécules de protéines, ce qui explique l'importance de ces détergents dans la solubilisation des protéines. Cette activité de laboratoire passe par l'analyse de trois types de protéines pures. Les étudiants modifient ensuite certaines de ces propriétés avec un détergent et réexaminent les propriétés physiques de ces protéines. Ils doivent alors observer comment les propriétés physiques des molécules de protéines peuvent être exploitées pour la purification et la caractérisation des protéines, et appliquer leurs résultats à un échantillon test d'extrait de tissu complexe.

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L'ADN plasmidique et l'ADN lambda sont prédigérés par des endonucléases de restriction qui reconnaissent et coupent l'ADN double brin dans des séquences de base définies ou à proximité. Les éléments digérés sont séparés par électrophorèse sur gel d'agarose.

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Cette expérience facile et sûre permet aux étudiants de découvrir la catalyse enzymatique, la nature de l'action des enzymes et la relation entre la fonction et la structure des protéines. Ils doivent effectuer un dosage enzymatique et déterminer la vitesse de la réaction enzymatique.

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L'isolement rapide et à petite échelle de l'ADN plasmidique est une procédure de routine utilisée pour cribler et analyser les ADN recombinants dans les expériences de clonage et de sous-clonage. Dans cette expérience, les étudiants isolent l'ADN plasmidique sans utiliser de produits chimiques toxiques comme le phénol ou le chloroforme.

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Résoudre le mystère de deux garçons séparés de leurs parents 10 ans plus tôt. Leur mère biologique est identifiée par son ADN mitochondrial et leur père biologique, par son ADN chromosomique.

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L'ADN du bactériophage lambda est une molécule linéaire bien caractérisée contenant six sites de reconnaissance d'EcoRI (5 sites distincts dont 2 ont des tailles très semblables). Dans le cadre de cette expérience, l'ADN lambda est digéré par l'endonucléase EcoRI. Les produits de la digestion sont analysés via une électrophorèse sur gel d'agarose.

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Dot blotting is a simple technique to identify a known protein in a biological sample. The ease and simplicity of the technique makes dot blotting an ideal diagnostic tool.

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Les étudiants ont la possibilité de résoudre un crime à l'aide de la PCR. Lorsqu'il est amplifié par PCR, l'ADN plasmidique fourni génère des produits représentant les profils génétiques des individus.

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Ce kit a été conçu pour montrer aux étudiants que les traits physiques des individus sont le reflet de leurs gènes. Dans cette simulation, les étudiants utilisent l'électrophorèse pour séparer les colorations représentant les traits génétiques.

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Cette expérience par simulation démontre le processus d'amplification de l'ADN par PCR et indique comment le produit amplifié est détecté via la séparation du mélange de réaction par électrophorèse sur gel d'agarose.

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Kit Ready-to-Load™ permettant de montrer comment l'électrophorèse sépare les molécules selon la taille et la charge.

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Dans le cadre de cette expérience, les étudiants se penchent sur la diversité des poissons à l'aide de protéines lyophilisées précolorées. Les protéines totales de la perche, du doré jaune et du saumon sont extraites et précolorées à l'aide d'un colorant indicateur. Lorsqu'il est séparé via une dénaturation par électrophorèse sur gel de polyacrylamide SDS, chaque échantillon de protéines de poisson possède un profil de bande caractéristique qui peut servir à identifier l'espèce en question.

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Les maladies coronariennes et les AVC sont des causes de décès majeures dans le monde occidental. De plus, dans les deux cas, des taux de cholestérol sanguin élevés représentent un facteur de risque sérieux. L'hypercholestérolémie familiale (HCF) d'origine génétique provoque une augmentation des taux sanguins du « mauvais » cholestérol, les lipoprotéines de basse densité (LDL). Chez les patients non traités porteurs du gène mutant de l'HCF, la maladie peut entraîner un décès prématuré. Cette expérience présente la réaction enzymatique colorimétrique à la base du test clinique de détermination du cholestérol. Par ailleurs, avec l'électrophorèse sur gel d'agarose, les étudiants peuvent analyser une simulation de criblage génétique visant à déterminer une maladie.

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La plupart des molécules ont une charge nette avec un pH compris entre 2 et 10. Lorsque le pH change, la charge nette sur les molécules peut considérablement varier. Dans le cadre de cette expérience, un mélange de 2 agents chimiques est absorbé dans une colonne d'échange ionique sur support solide et séparé durant l'élution dans des conditions influençant leur charge.

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Cette expérience présente la théorie chromatographique et les méthodes de chromatographie sur couche mince (CCM). Les colorants mélangés sont séparés sur une plaque de CCM en cellulose à l'aide de différents systèmes de solvants.

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Drinking water is routinely tested for contamination. If a screening tests positive, more sophisticated tests are required. One such test uses PCR in multiplex format. In this experiment, students test for the presence of three separate, classroom-safe organisms in a water sample using a single PCR reaction.

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Dans cette expérience, les cellules transformées acquièrent un plasmide contenant le gène de la protéine fluorescente verte (GFP). Le gène GFP a été isolé à partir de la méduse Aequorea victoria. Les colonies transformées qui expriment la protéine GFP apparaissent vertes à la lumière normale mais elles deviennent fortement fluorescentes lorsqu'elles sont exposées à une lumière UV à ondes longues.

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Kit Ready-to-Load™ permettant de présenter l'utilisation des enzymes de restriction comme un outil de digestion de l'ADN lambda dans des séquences de nucléotides spécifiques.

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When DNA is subcloned in the pUC polylinker region, β-galactosidase production is interrupted, resulting in the inability of cells to hydrolyse X-Gal. This results in the production of white colonies amongst a background of blue colonies. This experiment provides a DNA fragment together with a linear plasmid and T4 DNA ligase. Following the ligation to synthesis the recombinant plasmid, competent E. coli cells are transformed and the number of recombinant antibiotic-resistant white and blue colonies are counted. β-galactosidase activity is assayed from blue and white bacterial cells.

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À l'aide de LyphoProteins précolorées, les poids moléculaires des sous-ensembles sont déterminés par électrophorèse verticale sur gel de polyacrylamide avec l'agent dénaturant SDS. Il est attribué aux protéines précolorées dont les poids moléculaires sont inconnus des poids moléculaires basés sur la relative mobilité des marqueurs de protéines standard.

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Le kit PCR Ready-to-Load™ permet d'initier les étudiants aux principes et aux applications de la réaction en chaîne par polymérase (PCR). Cette expérience de simulation n'implique pas d'ADN humain et ne nécessite pas de thermocycleur.

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La modification génétique des plantes est un aspect de la biotechnologie sujet à controverse. Toutes les expériences réalisées sur les plantes commencent par l'établissement de cellules végétales dans des cultures. Cela implique la dédifférenciation des cellules végétales pour former des « cellules souches » des plantes. Dans le cadre de cette expérience, les étudiants réalisent des cultures cellulaires de violettes africaines à partir des feuilles. Ils utilisent ensuite des régulateurs de croissance végétale pour stimuler la croissance des racines à partir des cellules cultivées et produire une plante mature.

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Les gènes suppresseurs, comme le p53, sont essentiels aux fonctions cellulaires. Les mutations du gène p53 peuvent être mises en corrélation avec une prédisposition à certains cancers. Les mutations génétiques peuvent être héritées ou acquises en raison de conditions environnementales. Cette expérience concerne la détermination d'une généalogie de plusieurs générations en rapport avec l'apparition d'un cancer lié à la mutation du gène p53.

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Les étudiants utilisent des amorces pour insérer une séquence Alu de 300 paires de bases dans le chromosome 16 (PV92) afin de déterminer leur génotype. Ils peuvent ensuite comparer les résultats obtenus à ceux d'autres internautes à travers le monde.

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Investigate how agarose gel electrophoresis unlocks the color code used by food scientists to make colorful candies.

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Cette expérience simple montre la détection de la mutation responsable de l'anémie drépanocytaire. Dans cette simulation, les étudiants utilisent l'électrophorèse pour séparer les colorations représentant les échantillons du patient et les échantillons témoins.

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Dans cette expérience, les étudiants déterminent l'ascendance des membres d'une famille suspectés d'être porteurs d'une mutation du gène p53. Ils réalisent ensuite une analyse sur gel d'agarose afin de diagnostiquer l'état du gène p53 chez chaque membre de la famille.

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La cartographie de l'ADN est une procédure courante utilisée pour déterminer l'emplacement des gènes. Dans cette expérience, les marqueurs d'ADN et les fragments d'ADN plasmidique pré-digérés sont cartographiés par électrophorèse sur gel d'agarose.

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Les trois enzymes de restriction les plus fréquemment utilisées sont EcoRI, Bam HI et Hind III. Chaque enzyme catalyse le clivage lors de la séquence de bases définie. Toutes les enzymes sont lyophilisées et contiennent 1500 unités. Une unité est définie comme la quantité d'enzyme nécessaire pour digérer 1,0 µg d'ADN lambda en 60 minutes à 37 °C dans un mélange de réaction total de 50 µl.