qPCR SuperMix, PerfeCTa® MultiPlex

Dieser SuperMix ist ein zweifach konzentrierter, gebrauchsfertiger Reaktionscocktail für qRT-qPCR, mit allen Komponenten abgesehen von Primern, Sonden und Templates. Das System überschreitet die Multiplex-Grenzen von herkömmlichen PCR MasterMixes und ermöglicht die eindeutige Amplifikation von bis zu fünf Zielmolekülsequenzen in einem einzelnen Röhrchen. Die Unterdrückung von Ampliconen mit wenigen Kopien durch Referenzmoleküle mit vielen Kopien während der Amplifikation ist ein häufiges Problem bei der Multiplex-PCR. Dadurch kann die scheinbare Darstellung und Quantifizierung von Zielmolekülsequenzen mit wenigen Kopien verzerrt oder maskiert werden. PerfeCTa® MultiPlex qPCR SuperMix bietet einen dynamischen Bereich und eine Empfindlichkeit gegenüber einer Multiplex-qPCR, die vergleichbar mit denjenigen von Singleplex-qPCR-Fühler-Assays sind, ohne dass dabei begrenzte oder variable Primerkonzentrationen erforderlich sind.

Eine Hauptkomponente dieses SuperMixes ist die AccuStart™ Taq DNA-Polymerase mit monoklonalen Antikörpern, die sich an die Polymerase binden und sie vor dem ersten PCR-Denaturierungsschritt inaktiv halten. Nach der Wärmeaktivierung (2 Minuten bei 95 °C) denaturieren die Antikörper irreversibel und setzen vollständig aktive, unveränderte Taq DNA-Polymerase frei. So ist eine spezifische und effiziente Primer-Extension mit dem Vorteil des Reaktionsaufbaus bei Zimmertemperatur möglich.