One Step Fast qRT PCR-kits, qScript™

Deze kits bieden een eenvoudige en zeer gevoelige oplossing voor realtime reverse transcriptase-PCR (qRT-PCR) van RNA-templates door gebruik te maken van detectiechemie met hybridisatieprobes, zoals TaqMan® 5'-hydrolyseprobes.

Met het systeem kan cDNA-synthese en PCR-amplificatie worden uitgevoerd in hetzelfde buisje. Dit is ideaal voor hooggevoelige kwantificatie van RNA-virussen of spaarzaam voorkomende RNA-targets, en tevens voor genexpressieonderzoeken met hoge doorvoer. Het systeem is ook geoptimaliseerd om maximale RT-PCR-effectiviteit, gevoeligheid en specificiteit in gereduceerde reactievolumes, en snelle cyclustijden te leveren.

Snelle eenstaps mastermengsels worden geleverd als een 4X geconcentreerde oplossing, waardoor er meer RNA-templates kunnen worden toegevoegd en de detectiegevoeligheid voor monsters met lage concentraties wordt verbeterd. De unieke formule maximaliseert de activiteit van zowel reverse transcriptase en Taq DNA-polymerase, terwijl de kans op primerdimer- en andere niet-specifieke PCR-artefacten wordt geminimaliseerd. Hierdoor is onverstoorde co-amplificatie van transcripten met een laag kopienummer in de aanwezigheid van refererentiegenen met een hoger kopienummer mogelijk in dubbele qRT-PCR-toepassingen.

Zeer specifieke amplificatie is cruciaal voor een succesvolle qRT-PCR, aangezien niet-specifieke producten kunnen meedingen naar amplificatie van de targetsequentie en de PCR-effectiviteit nadelig kunnen beïnvloeden. Een belangrijk onderdeel van deze kits is AccuStart™ Taq DNA-polymerase met monoklonale antilichamen die de polymerase binden en inactief houden tijdens de reactievorming en de omgekeerde transcriptie bij 50 °C. Een korte hitteactivering van 30 seconden bij 95 °C denatureert de antilichamen onomkeerbaar, waarbij volledig actieve, ongemodificeerde Taq DNA-polymerase wordt vrijgegeven. Een snel herstel van volledig actieve, ongemodificeerde Taq DNA-polymerase is belangrijk voor een efficiënte, uitgebreide kinetiek. Daarom zorgen deze kits voor een beter reagensbeheer en een hogere doorvoer in laboratoria op conventionele of snelle qPCR-systemen.

Bestelinformatie: Er zijn kits leverbaar voor alle realtime PCR-instrumentplatforms, ook die waarvoor normalisatie met ROX-referentiekleurstof vereist is.