Nucléase Cas9 (4 μg/μl) pour la génération de cassures double-brin dans l'édition du génome par CRISPR-Cas9.

La nucléase ArciTect™ Cas9 nécessite une association avec un ARN guide - par exemple ArciTect™ sgRNA (Catalogue #STMC200-0013) ou un duplex composé d'ArciTect™ tracrRNA (Catalogue #STMC76016) et d'ArciTect™ crRNA (Catalogue #STMC76010) - pour former un complexe de ribonucléoprotéines (RNP). Ce complexe RNP crée ensuite des cassures double brin à des emplacements spécifiques du génome. ArciTect™ Cas9 Nuclease contient un signal de localisation nucléaire à l'extrémité N-terminale, garantissant que le complexe RNP se transloque vers le noyau, augmentant ainsi l'efficacité de l'édition du génome. Le complexe RNP étant pleinement fonctionnel dès la transfection, il permet une activité immédiate après la translocation dans le noyau. Le complexe RNP se dégrade en 48 heures, ce qui laisse suffisamment de temps pour que l'édition du génome ait lieu tout en réduisant les effets hors cible qui peuvent être causés par la présence continue du complexe RNP. L'utilisation du système RNP permet également de contourner le processus laborieux de génération de lignées cellulaires stables exprimant Cas9, ce qui permet de gagner du temps et de réduire le risque d'effets hors cible dus à des systèmes d'expression inductibles présentant des fuites. La S. pyogenes Cas9 utilise la séquence NGG (où N peut être n'importe quel nucléotide) du motif adjacent protospacer (PAM). L'enzyme ne se clive pas sans un site PAM génomique en aval de la séquence cible.