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Cette activité de laboratoire est conçue pour démontrer les différentes classes de molécules de protéines et leur classification d'après leur solubilité. Les étudiants s'initient au fractionnement des protéines membranaires solubles et insolubles, et des protéines du cytosquelette provenant d'un échantillon de tissu. La fraction de protéine insoluble est davantage fractionnée en protéines membranaires hydrophiles et hydrophobes. La structure des membranes cellulaires et le rôle des protéines membranaires hydrophobes sont pris en compte. Cette activité de laboratoire offre également la possibilité de comprendre les caractéristiques de différentes classes de détergents et le rôle de ces dernières dans la solubilisation des protéines membranaires hydrophobes.

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Le kit des propriétés physiques des protéines est une activité de laboratoire qui permet aux étudiants de se pencher sur les propriétés physiques de différentes protéines. Les étudiants se familiarisent avec la solubilité des protéines et apprennent comment elle est affectée par des paramètres variés, tels que la température, le pH, le sel et la constante diélectrique. Ils assimilent la précipitation des protéines due au pH, à une grande concentration de sel et en présence de solvants organiques, et la dénaturation des protéines résultant d'une température élevée. De plus, le kit démontre dans quelle mesure les non-protéines, comme les détergents, modifient considérablement les propriétés physiques des molécules de protéines, ce qui explique l'importance de ces détergents dans la solubilisation des protéines. Cette activité de laboratoire passe par l'analyse de trois types de protéines pures. Les étudiants modifient ensuite certaines de ces propriétés avec un détergent et réexaminent les propriétés physiques de ces protéines. Ils doivent alors observer comment les propriétés physiques des molécules de protéines peuvent être exploitées pour la purification et la caractérisation des protéines, et appliquer leurs résultats à un échantillon test d'extrait de tissu complexe.

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Dot blotting is a simple technique to identify a known protein in a biological sample. The ease and simplicity of the technique makes dot blotting an ideal diagnostic tool.

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Milk proteins are the most common food allergens in children. Accurate detection and labeling is vital to inform consumers about potentially dangerous foods.

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Investigate how agarose gel electrophoresis unlocks the color code used by food scientists to make colorful candies.

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Cette expérience permet d'initier les étudiants aux digestions par enzymes de restriction dans un contexte de police scientifique. Les étudiants découpent l'ADN avec des enzymes de restriction, puis comparent le profil des bandes de l'ADN de la scène de crime à celui de deux suspects via une électrophorèse sur gel d'agarose.

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Les trois enzymes de restriction les plus fréquemment utilisées sont EcoRI, Bam HI et Hind III. Chaque enzyme catalyse le clivage lors de la séquence de bases définie. Toutes les enzymes sont lyophilisées et contiennent 1500 unités. Une unité est définie comme la quantité d'enzyme nécessaire pour digérer 1,0 µg d'ADN lambda en 60 minutes à 37 °C dans un mélange de réaction total de 50 µl.

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La cartographie de l'ADN est une procédure courante utilisée pour déterminer l'emplacement des gènes. Dans cette expérience, les marqueurs d'ADN et les fragments d'ADN plasmidique pré-digérés sont cartographiés par électrophorèse sur gel d'agarose.

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Dans cette expérience, les étudiants déterminent l'ascendance des membres d'une famille suspectés d'être porteurs d'une mutation du gène p53. Ils réalisent ensuite une analyse sur gel d'agarose afin de diagnostiquer l'état du gène p53 chez chaque membre de la famille.

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Cette expérience simple montre la détection de la mutation responsable de l'anémie drépanocytaire. Dans cette simulation, les étudiants utilisent l'électrophorèse pour séparer les colorations représentant les échantillons du patient et les échantillons témoins.

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When bacteria are used to make medicinally useful proteins by transformation, the protein of interest must be separated from all of the other cellular proteins. In this experiment, the unique fluorescent properties of GFP and BFP are used as an assay during their purification from an E. coli extract. The column fractions containing GFP or BFP are identified by fluorescence and then purified. As an optional activity, purified protein fractions can be separated by SDS polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) to estimate the purity and size of the GFP and BFP proteins.

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Cette expérience familiarise les étudiants avec l'utilisation de l'identification génétique dans le cadre d'un exercice de détermination de paternité simulée. L'empreinte génétique d'un enfant est comparée à celle de ses parents.

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Quatre modules d'expérimentation sont regroupés dans une expérience afin d'obtenir une exploration biotechnologique complète axée sur la protéine fluorescente verte (GFP). Les cellules bactériennes sont transformées pour exprimer la GFP. Les cellules transformées sont ensuite mises en culture et la GFP est purifiée par chromatographie sur colonne. Enfin, la pureté des fractions de protéines est analysée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide SDS.

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La protéine fluorescente verte (GFP) de la méduse Aequorea victoria s'utilise dans tous les domaines de la science. De nombreux organismes ont été transformés avec le gène GFP, gène responsable de la bioluminescence chez les méduses. Il a démontré une telle utilité que les scientifiques l'ont muté pour produire la protéine fluorescente bleue (BFP). Dans cette expérience simple, les étudiants transforment des bactéries par GFP, BFP ou les deux.

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Cette expérience fait appel à la PCR pour amplifier une petite section d'ADN lambda via un processus en 2 étapes, ce qui permet de gagner beaucoup de temps en classe et de réaliser une expérience de laboratoire en une session.

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Cette expérience consiste en une simulation de bioterrorisme, pendant laquelle les étudiants examinent une simulation d'identification génétique par l'ADN pour la détection de la variole.

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Par cette expérience, les étudiants observent un changement de couleur bleue dans les cellules transformées, dû à l'activation d'un gène. Le plasmide pGAL donne un colorant bleu en raison de la production de la protéine β-galactosidase par le gène lacZ. L'IPTG n'est pas nécessaire, le pGAL contenant le gène lacZ complet.

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L'isolement rapide et à petite échelle de l'ADN plasmidique est une procédure de routine utilisée pour cribler et analyser les ADN recombinants dans les expériences de clonage et de sous-clonage. Dans cette expérience, les étudiants isolent l'ADN plasmidique sans utiliser de produits chimiques toxiques comme le phénol ou le chloroforme.

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Cette expérience facile et sûre permet aux étudiants de découvrir la catalyse enzymatique, la nature de l'action des enzymes et la relation entre la fonction et la structure des protéines. Ils doivent effectuer un dosage enzymatique et déterminer la vitesse de la réaction enzymatique.

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L'ADN plasmidique et l'ADN lambda sont prédigérés par des endonucléases de restriction qui reconnaissent et coupent l'ADN double brin dans des séquences de base définies ou à proximité. Les éléments digérés sont séparés par électrophorèse sur gel d'agarose.

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L'ADN du bactériophage lambda est une molécule linéaire bien caractérisée contenant six sites de reconnaissance d'EcoRI (5 sites distincts dont 2 ont des tailles très semblables). Dans le cadre de cette expérience, l'ADN lambda est digéré par l'endonucléase EcoRI. Les produits de la digestion sont analysés via une électrophorèse sur gel d'agarose.

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Résoudre le mystère de deux garçons séparés de leurs parents 10 ans plus tôt. Leur mère biologique est identifiée par son ADN mitochondrial et leur père biologique, par son ADN chromosomique.

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L'encéphalopathie spongiforme bovine (ESB), également appelée maladie de la vache folle, est une infection neurodégénérative mortelle des bovins. La consommation de viande de bœuf infectée par l'ESB est tenue pour responsable d'une infection similaire chez les humains, la maladie de Creutzfeldt-Jakob. Dans cette expérience, les étudiants examinent des produits PCR simulés issus de différents broyeurs afin de déterminer les violations éventuelles de l'interdiction d'alimentation du bétail avec des protéines animales.

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Cette expérience présente une méthode simple destinée à déterminer le poids moléculaire des sous-unités protéiques par électrophorèse horizontale. Les étalons protéiques et les éléments inconnus étant précolorés, la séparation des protéines peut s'observer durant l'électrophorèse. L'expérience inclut de l'agarose de classe protéique, solution alternative aux gels de polyacrylamide.

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La technologie des micro-échantillons permet aux scientifiques d'analyser de nombreux échantillons en un dosage. Elle offre un criblage à haut rendement de petits échantillons et permet de comparer des tissus sains et malades. Dans le cadre de cette expérience, les étudiants appliquent des échantillons simulés d'ADN et d'ARN à une membrane pour dépister les échantillons positifs et négatifs.

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Avec cette activité de laboratoire, les étudiants ont la possibilité de voir à quoi ressemble réellement de l'ADN chromosomique et d'explorer les procédures d'extraction de l'ADN.

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On considère que les mitochondries ont évolué à partir d'une relation symbiotique entre procaryotes et eucaryotes. Les mitochondries ont leur propre ADN et sont transmis exclusivement par la mère. Dans le cadre de cette expérience, les étudiants amplifient deux régions de leur ADN mitochondrial.

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In this experiment, students purify the restriction enzyme, Eco RI. This procedure utilised an ion exchange chromatograph step for Eco RI purification. Column fractions are assayed for the enzyme using Lambda DNA and digestion products are identified by gel electrophoresis. Fractions that contain Eco RI are identified and pooled. The total and specific activities are calculated. Recommended for advanced courses.

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Isolation of high molecular weight chromosomal DNA is the first step in molecular cloning since it is the source of genes in cells. This experiment provides DNA extraction LyphoCells and reagents for isolating chromosomal DNA from E. coli. After spooling from solution, the DNA can be dissolved and analysed by agarose gel electrophoresis as an optional lab extension activity.

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La méthode de transfert de Southern est une technique primordiale, largement utilisée en génétique et en recherche cliniques. En transférant l'ADN d'un gel d'agarose sur une membrane, cette méthode permet l'analyse et l'identification précises de bandes d'ADN sur un gel. Avec ce kit, les étudiants se servent du transfert de Southern pour trouver une mutation ponctuelle dans le gène de l'hémoglobine, révélateur d'une drépanocytose.